蝮蛇凝血酶生产制造技术专题资料光盘
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第  13  年
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序号                             技术名称
1 一个新的尖吻蝮蛇蛇*类凝血酶及其止血活性
[技术摘要] 本发明的类凝血酶涉及生物医药和酶学领域。具体地讲,涉及一种从尖吻蝮蛇蛇*中提取的、具有止血活性酶的结构特征,纯化方法和医药领域用途。该酶分子量为37KDa(SDS-PAGE法),单肽链组成,其N端15个氨基酸残基的序列:Val-Ile-Gly-Gly-Asn-Glu-Cys-Asp-Thr-Asn-Glu-His-Arg-Phe-Leu。HPLC为单峰。该酶最适温度为37℃,最适pH 7.5,等电点为5.86。血浆凝结**在60±5秒,同时可使纤原凝结,血浆比活大于500U/mg。该酶在体内使全血凝固时间显著缩短,不造成血栓形成,用于预防临床手术出血、治疗外伤出血、全身和局部止血。

2 尖吻蝮蛇*凝血酶原激活剂、其编码序列及用途
[技术摘要] 本发明提供了一种新的凝血酶原激活剂-尖吻蝮蛇*凝血酶原激活剂(简称:凝血酶原激活剂DaPA),编码凝血酶原激活剂DaPA的多核苷酸和经重组技术产生这种凝血酶原激活剂DaPA的方法。本发明的凝血酶原激活剂DaPA可激活凝血酶原从而可在临床上用作止血药物。

3 新的具有止血活性的尖吻蝮蛇蛇*类凝血酶
[技术摘要] 本发明的类凝血酶涉及生物医药和酶学领域。具体地讲,涉及一种从尖吻蝮蛇蛇*中提取的、具有止血活性酶的结构特征,纯化方法和医药领域用途。该酶全分子量为31KD(SDS-PAGE法),有相近两个亚基16KD和15KD组成,其N端15个氨基酸残基的测序A亚基:DCSSGWSSYEEHQYY,B亚基:DSSGWSSYEGHEYYV。HPLC为单峰。该酶最适温度为35℃,最适pH 7.5,等电点为5.39。用酸水解测得该酶有18或20种氨基酸组成。血浆凝结**在60±5秒,同时可使纤原凝结。该酶在体内使全血凝固时间显著缩短,不造成血栓形成,用于预防临床手术出血、治疗外伤出血、全身和局部止血及诊断某些临床凝血时间。

4 尖吻蝮蛇蛇*类凝血酶的基因序列
[技术摘要] 从尖吻蝮蛇中分离纯化得到类凝血酶,测定该酶N端15个氨基酸的序列,据此设计简并的上游引物,其中含有翻译起始**子ATG,以利于该基因的表达。然后根据与其它蝮属蛇*类凝血酶3’非编码区同源性较高区域设计简并的下游引物。从*腺中抽提总RNA,用PCR扩增出该基因,克隆后经全序列测定表明该成熟蛋白的cDNA编码699个核苷酸,即233个氨基酸。该基因的成功克隆及基因序列测定为开发基因工程产品创造良好条件。

5 一种尖吻蝮蛇凝血酶的分离纯化方法
[技术摘要] 本发明公开了一种尖吻蝮蛇凝血酶的分离纯化方法,属于蛇*蛋白技术领域,分离纯化的方法是:磷酸缓冲液溶解蛇*→层析柱去除热原后平衡→一次纯化→透析→再次纯化→三次纯化→脱盐→鉴定。本发明的方法利用磷酸缓冲液对尖吻蝮蛇粗*进行分离纯化,分离纯化的尖吻蝮蛇凝血酶纯度高(大于95%),收率较高(可达6~8%),可以为尖吻蝮蛇*的有效利用提供一种新途径。

6 中国辽宁省大连蛇岛蝮蛇*液中类凝血酶基因cDNA序列及其克隆
7 一种尖吻蝮蛇*凝血酶及其生产方法
W
8 尖吻蝮蛇凝血酶用作治疗出血性疾病的药物
N
9 具有止血活性的尖吻蝮蛇蛇*类凝血酶
D
10 尖吻蝮蛇*凝血酶及其生产方法



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